pengenalan

Dalam makmal bioperubatan dan kimia moden,tiub kultur pakai buang digunakan secara meluas dalam kultur sel, tindak balas kimia, pemeliharaan sampel dan operasi kritikal yang lain.Kepentingan mereka dalam proses eksperimen tidak boleh diabaikan. Oleh kerana tiub kultur ini bersentuhan langsung dengan sampel eksperimen, bahan, saiz, penutupan dan sama ada ia disterilkan atau tidak akan memberi kesan yang ketara ke atas keputusan eksperimen. Pemilihan yang tidak betul boleh membawa kepada pencemaran silang, kehilangan sampel atau bias data eksperimen, sekali gus menjejaskan ketepatan dan kebolehulangan kajian.

Jenis Utama Tiub Kultur Pakai Buang

Terdapat pelbagai jenis tiub kultur pakai buang, dan penyelidik perlu memilih jenis yang betul mengikut tujuan eksperimen, persekitaran operasi dan ciri-ciri sampel. Mereka dikategorikan dalam tiga aspek berikut: bahan, kapasiti dan fungsi khas:

1. Pengelasan mengikut bahan

Tiub kultur pakai buang yang diperbuat daripada bahan berbeza berbeza dalam rintangan suhu, kestabilan kimia dan sifat optik:

• Polipropilene: Rintangan yang baik terhadap suhu tinggi dan kakisan kimia, sesuai untuk kultur sel rutin, eksperimen biologi molekul dan aplikasi lain.
• Polistirena: ketelusan yang tinggi, mudah untuk melihat keadaan cecair dan sel, biasanya digunakan dalam ujian optik, tetapi tidak rintangan suhu tinggi, biasanya tidak boleh digunakan untuk autoklaf.
• Tiub kultur kaca: Walaupun boleh diguna semula dan stabil secara kimia, ia mahal, memerlukan prosedur pembersihan dan pensterilan tambahan, dan menimbulkan potensi risiko pencemaran silang.

2. Pengelasan mengikut kapasiti

Bergantung pada isipadu sampel yang diperlukan untuk eksperimen, kapasiti tiub kultur adalah dari volum mikro hingga besar:

• Tiub microcentrifuge: biasa digunakan untuk pendispensan sampel, pemendakan emparan, pengekstrakan DNA/RNA dan operasi lain.
• Tiub kultur standard: kapasiti yang paling biasa digunakan dalam makmal, sesuai untuk kultur sel, tindak balas pencampuran, pemeliharaan sampel dan tujuan lain.
• Tiub kultur berkapasiti besar: sesuai untuk kultur sel berskala besar atau pemprosesan larutan dalam jumlah besar.

3. Pengelasan mengikut fungsi khas

Tiub tersedia dengan pelbagai ciri tambahan untuk memenuhi keperluan eksperimen tertentu:

• Tiub Pra-steril Aseptik: kilang disterilkan oleh sinaran gamma atau autoklaf, sesuai untuk eksperimen dengan keperluan aseptik yang tinggi.
• Dengan penutup kartrij: membenarkan pertukaran gas, sesuai untuk mikroorganisma atau saluran sel yang memerlukan pengudaraan dan menghalang pencemaran daripada sumber eksogen.
• Tiub Tahan Suhu Rendah: boleh digunakan dengan selamat dalam -80℃ atau persekitaran nitrogen cecair, sesuai untuk pemeliharaan suhu rendah jangka panjang sampel biologi.
• Tabung bergraduat/tidak lulus: Tiub bergraduat adalah mudah untuk anggaran cepat dan pendispensan isipadu cecair untuk meningkatkan kecekapan eksperimen.

Faktor Utama dalam Memilih Tiub Budaya

Dalam proses reka bentuk dan operasi eksperimen, pemilihan tiub kultur pakai buang yang sesuai adalah penting untuk memastikan kecekapan dan ketepatan hasil percubaan. Penyelidik harus mempertimbangkan secara komprehensif beberapa faktor utama:

1. Jenis eksperimen

Keperluan untuk tiub kultur berbeza dengan ketara dari eksperimen ke eksperimen dan harus dipilih mengikut kandungan operasi dan persekitaran eksperimen:

• Untuk kultur sel: keperluan untuk kemandulan adalah sangat tinggi, dan penggunaan tiub pra-steril steril dengan penutup kartrij bernafas untuk memastikan pertukaran gas disyorkan.
• Eksperimen PCR / biologi molekul: perlu bebas daripada enzim DNA, enzim RNA dan tiub bebas pirogen, selalunya menggunakan tiub polipropilena gred bersih.
• Penyimpanan suhu rendah: Tiub dengan rintangan suhu rendah yang baik harus digunakan untuk mengelakkan lisis pada suhu rendah.

2. Ciri-ciri sampel

Sifat fizikokimia sampel secara langsung mempengaruhi pilihan bahan dan konfigurasi fungsian tiub kultur:

• Sampel cecair atau pepejal: menentukan isipadu yang diperlukan dan bentuk orifis tiub.
• Sampel asid atau alkali: sampel yang sangat menghakis memerlukan bahan tahan kimia untuk mengelakkan ubah bentuk atau pencemaran tiub.
• Sama ada untuk mengelakkan cahaya: sampel sensitif cahaya harus memilih tiub kultur bahan ambar atau legap, untuk mengelakkan photodegradation.

3. Keperluan pensterilan

Keperluan untuk pensterilan dan jenis pensterilan yang digunakan adalah pertimbangan utama dalam pemilihan tiub:

• Pra-pensterilan berbanding pensterilan diri: produk pra-steril kilang adalah sesuai untuk eksperimen berdaya tinggi, menjimatkan masa; jika makmal mempunyai peralatan pensterilan autoklaf, anda boleh memilih tiub PP yang boleh diautoklaf.
• Keserasian pensterilan: Sebagai contoh, bahan PS tidak sesuai untuk autoklaf dan hanya untuk kegunaan sekali sahaja.

4. Keserasian

Tiub harus disesuaikan dengan peralatan makmal untuk memastikan operasi lancar dan hasil yang boleh dipercayai:

• Keserasian emparan: Tiub yang digunakan untuk sentrifugasi perlu kuat dari segi struktur untuk menahan daya emparan pada kelajuan putaran yang tinggi.
• Keserasian automasi: Untuk eksperimen yang memerlukan penggunaan robot pipet, sistem pendispensan automatik, dsb., saiz tiub piawai mesti digunakan.

5. Kos dan kemampanan

Kawalan kos dan penggunaan sumber yang munasabah juga merupakan pertimbangan penting dalam memenuhi keperluan eksperimen:

• Boleh guna vs. boleh guna semula: tiub pakai buang mudah diurus dan mengelakkan pencemaran, sesuai untuk eksperimen berkemampuan tinggi; tiub kaca boleh guna semula sesuai untuk eksperimen asas dengan bajet terhad.
• Skala pembelian: pembelian volum besar boleh mengurangkan harga seunit, sesuai untuk projek jangka panjang, berskala besar; skala kecil, spesifikasi tersuai adalah lebih fleksibel tetapi kos yang agak tinggi.

Pengesyoran untuk Senario Aplikasi Biasa

Mengikut keperluan khusus pelbagai jenis eksperimen, tiub kultur pakai buang berikut disyorkan untuk beberapa senario aplikasi biasa, bertujuan untuk meningkatkan kecekapan dan kebolehpercayaan eksperimen:

1. Penanaman sel

• Jenis yang disyorkan: tiub kultur polipropilena steril dengan penutup kartrij yang boleh bernafas
• Sebab: Bahan polipropilena mempunyai lengai kimia yang baik dan biokompatibiliti, sesuai untuk cecair kultur sel. Penutup kartrij boleh merealisasikan pertukaran gas yang berkesan, mencegah pencemaran mikrob, dan memenuhi persekitaran gas yang diperlukan untuk percambahan sel.

2. Realisasi molekul PCR/qPCR

• Jenis yang disyorkan: tiub PCR khusus bebas nuklease, bebas pirogen atau tiub microcentrifuge
• Sebab: Tiub polipropilena ketulenan tinggi, selepas rawatan yang ketat, boleh mengelakkan degradasi atau pencemaran sampel dengan berkesan, untuk memastikan hasil penguatan yang tepat dan boleh dipercayai. Reka bentuk dinding nipis disyorkan untuk meningkatkan kecekapan pemindahan haba.

3. Penyimpanan suhu rendah

• Jenis Disyorkan: Tiub Polipropilena Tahan Suhu Rendah dengan Reka Bentuk Retak Anti-Beku dan Penutup Pengedap Skru
• Sebab: Tiub ini boleh digunakan untuk menyimpan sampel untuk jangka masa yang lama pada -80°C atau bahkan dalam nitrogen cecair, dan struktur khas menghalang tiub daripada retak rapuh dan kebocoran sampel. Sesuai untuk penyimpanan jangka panjang garisan sel, sampel darah, protein atau asid nukleik.

4. Empar

• Jenis yang disyorkan: tiub polipropilena toleransi tinggi, reka bentuk bahagian bawah bulat atau kon, dengan pemutar emparan
• Sebab: Tiub PP mempunyai rintangan emparan yang baik dan boleh menahan daya emparan yang tinggi tanpa ubah bentuk atau pecah. Bahagian bawah kon membantu mengumpul sel atau mendakan secara berpusat dan meningkatkan kadar pemulihan.

Kesilapan Biasa dan Cara Mengelakkannya

Dalam amalan, kegagalan eksperimen disebabkan pemilihan tiub kultur yang tidak betul berlaku dari semasa ke semasa. Beberapa kesilapan biasa dan cadangan yang sepadan untuk penyelesaian disenaraikan di bawah untuk rujukan penyelidik:

1. Penyalahgunaan bahan tidak tahan suhu tinggi untuk autoklaf